成功复养的重点在这！快速且准确的非瘟检测不可忽视！

农牧前沿原创报道，

　　现场10分钟即出检测结果，行业急需的非瘟检测产品面世。

　　文/图 农牧前沿 朱敬强

　　非洲猪瘟肆虐中国一年有余，时至今日依然难以净化。调查表明，很多猪场在遭受非瘟打击后，仍然有部分猪只存活了下来，成为所谓的非瘟耐过猪，但这并非喜讯，耐过猪的出现意味着非瘟病毒会长期保留于猪群中，一旦猪群免疫下降，可能会出现新的排毒与爆发。而更大风险是耐过猪的病毒血症轻微，导致常规的分子生物学核酸检测难以对其排查。在这样的背景下，抗体检测的必要性日益显现。

　　据农牧前沿了解，台湾凌越生医股份有限公司已成功研发非洲猪瘟病毒抗体快速诊断试剂，该产品已通过了世界动物卫生组织OIE在英国、西班牙的非洲猪瘟参考实验室评估，并推向了菲律宾、越南等国家，正于大陆市场推广。为此，农牧前沿拜访台湾凌越中国大陆战略合作伙伴广州中农大生物科技有限公司，在与运营总监刘湘川、技术服务总监马磊博士、市场部经理白杨的交流中了解台湾凌越以及抗体检测产品的详细信息。

　　用极致便捷带来快速准确的非瘟诊断

　　农牧前沿：可否简单介绍一下台湾凌越？

　　刘湘川：台湾凌越全称是凌越生医股份有限公司（以下简称“凌越”），于1993年在工业技术研究院育成中心成立，主要以“免疫萤光试剂”为平台，提供生物免疫系统检测与支持性辅助疗程相关产品的研发，并致力于人与动物过敏反应引发的相关疾病管理与治疗观念推广。1997年台湾爆发口蹄疫，凌越用将近8年时间研发出四个针对口蹄疫的诊断试剂，是2018年底台湾口蹄疫正式净化前的主要诊断试剂。因为与世界动物卫生组织OIE参考实验室联系密切，早在2017年就开始非洲猪瘟相关研究，是国内较早开展非洲猪瘟抗原抗体检测试剂研究的企业。因发展需求，凌越与中农大合作在大陆成立分公司，除扩大产能开拓大陆市场外，也将进行分子生物学诊断试剂和配套设备的研发，不仅仅是非洲猪瘟，还将覆盖畜禽各项疾病的检测。

　　农牧前沿：相较市面的其他检测产品，该产品的主要优势是什么？

　　刘湘川：本产品优势可简单概括为便捷、快速、准确。首先，凌越非洲猪瘟病毒抗体快速诊断试剂板（以下简称“检测板”或“本产品”）无需冷藏，常温下即可保存，市面常见的PCR检测试剂则需要冷冻保存；第二，本产品为单样检测，可避免交叉污染；再者，本产品使用便捷，养户只需在猪耳边、尾尖或者后腿内测用针刺一下静脉血管，用配套吸管采集一滴血液，10分钟即可在现场得到诊断结果，无需专业人员实验室操作，无需其他仪器设备；此外，检测板使用后可直接焚烧，以避免成为传染源；生猪感染非洲猪瘟的1-7天为感染早期，其体内抗体浓度不足以检测，本产品最早可以在感染后8天检测出准确结果；在产品研发完成后，我们将产品送往了OIE的英国、西班牙非洲猪瘟参考实验室进行评价，凌越检测板与非洲猪瘟参考实验室采用的酵素结合免疫吸附分析法（ELISA）检测结果100%符合。

　　排查耐过猪，抗体检测必不可少

　　农牧前沿：该产品的市场定位是怎样的？主要目标客户是哪些？

　　刘湘川：第一类目标客户是散养户，普通的小规模散养户不具备通过实验室做出早期判断的条件，但是如果常备本产品，一经发现某头猪只异样，即可在现场快速诊断是否为非洲猪瘟感染，及时做出后续处理。第二类目标客户是需要引进种猪、后备猪、育肥猪的较大型养猪场，非洲猪瘟在中国传播一年有余，使得猪群中出现很多无病毒血症但脏器中仍藏有活病毒的耐过猪，该类猪通过常规的PCR核酸检测（抗原检测）难以检测到病原，当环境变化或其他因素引起猪只发生应激反应抵抗力下降，耐过猪仍可能再次出现病毒血症并向外排毒，因此，从场外引进猪源前必须要同时进行抗原检测和抗体检测，排查耐过猪。第三类目标客户是接种疫苗的养猪场，将来疫苗研发成功，该产品可用于疫苗作用效果的评价和猪场免疫程序的制定（补苗周期），后续开发的产品甚至可以鉴别疫苗与野毒。

　　此外，该产品也可以应用于猪场非瘟防控的检测。非瘟防控分三个层面，第一层是猪场外环境的阻隔，包括道路、运输车辆、水、空气等，该层面应用PCR进行检测；第二层是猪场内部环境的洗消，同样是应用PCR进行检测；第三层是生猪的非瘟监测。非瘟监测分两阶段，第一阶段是在生猪无症状时采集鼻腔粘液或唾液进行PCR检测，可以在早期（猪瘟最先接触的是口和鼻腔）排查出感染病毒的生猪，但仅可反映该时间点是否存在病毒；第二阶段是应用本产品进行抗体检测，检测结果（强阳性、弱阳性，阴性）将成为“拔牙”或其他处理方式的指导依据。

　　农牧前沿：引种前若通过该产品排查耐过猪大约需要多大成本？

　　刘湘川：引种建议逐头检测非瘟抗体，以引种100头为例大约需要7千元。

　　20年技术积累，得以达到95%的纯度

　　农牧前沿：该产品的核心竞争力是什么？如何应对市场竞争？

　　刘湘川：就目前而言，市面上销售非洲猪瘟病毒抗体快速诊断试剂板的企业除凌越外只有一家外企，但其产品与本产品仍有一定差异性，国内尚未有企业将快检卡做到凌越的水平。今年，农业部先后公布了两批非洲猪瘟快速检测试剂名单，但所公布产品均为PCR检测试剂盒，需要实验室和专业人员不说，检测时间也长达1-2小时。所以当有其他企业做出了抗体快检卡时，我们或许已经做出了抗原快检卡甚至做出了手持判读器，总之会领先其他企业一步。

　　农牧前沿：该产品的研发难在哪里？为什么包括凌越在内仅有两家企业可做出抗体检测板？

　　刘湘川：评价快速检测试剂效果有三项指标，即灵敏度、特异性、重复性。只有找到合适的蛋白，并有足够高的纯度，才能满足三项指标进而保证其准确性。经过大量实验，我们发现非洲猪瘟病毒的P30蛋白相较其他快速检测试剂常用的P72蛋白表达更早并且有更高的表达量，但是纯化更为困难。而作为一家从事过敏原检测试剂研发的企业，台湾凌越有长达20年的精确纯化技术积累，最终使试剂纯度达95%以上。

　　农牧前沿：抗原快速检测板研发难度更大吗？

　　刘湘川：抗原快速检测板的技术难度的确更大，目前市面的抗原检测敏感性很差，远达不到OIE规定的80%的要求。

　　与云端结合，快检卡或将变革企业的疫病监控系统

　　农牧前沿：该产品是什么时候上市的？应用效果反馈如何？

　　刘湘川：今年3月份该产品研发成型，4-6月份我们将产品送往了OIE的英国、西班牙非洲猪瘟参考实验室进行评价，7月份才正式上市，至今为止该产品仍主要在华中农业大学、南京农业大学、华南农业大学以及有条件的企业实验室进行准确度测试，效果反馈良好，其结果甚至可能成为实验室用来复核非瘟抗体ELISA检测结果的一个参照标准。

　　农牧前沿：目前该产品是如何在市场推广的？

　　刘湘川：经过我们的前期调研，我们发现在长江以北，中小养殖户仍是猪肉供应的主体，所以我们将以省为单位寻找与散户连接的销售渠道，向下联络上百个网点推广销售，让需要的养户在第一时间看到并得以购买。而长江以南养殖业规模化程度较高，我们需要推广的“机遇”，如政府加强生猪流通监查，企业复养前引进猪源，因为较为规范的大型养殖企业的需求如果是在1-8天内（感染早期）做出检测，则不适合用本产品，但可以将本产品作为非瘟感染诊断工具，其结果可作为后续处理的指导依据。

　　除此之外，我们正规划推广快检卡产品主导的疫病监控系统。为避免成为病原传播源，大企业的常规猪群疫病监控系统下养殖场通常不设实验室，所有养殖场的检测样本送往中心实验室统一检测并管理数据。快检卡将在未来打破这种体系，快检卡在临床单样检测，用后可直接焚烧销毁，不会成为传染源，养殖场将快检卡插入本公司的检测仪器，即可通过云端将数据传至中心实验室统一管理。我们认为该系统可能会带动集团企业疫病监控的变革。