张日俊教授筛选出高产细菌素乳酸菌菌株，新的抗生素替代品诞生

农牧前沿独家报道，

　　文/ 农牧前沿 朱敬强
　　图/ 水产前沿 翁泽嘉

　　特色菌株的筛选是生物发酵饲料的研究核心，而乳酸菌作为发酵饲料的常用菌种，更是处在举足轻重的地位，在9月7日举办的第七届中国生物饲料科技大会中，中国农业大学动物科技学院张日俊教授带来题为《发酵饲料中高产细菌素及EPS乳酸菌筛选及功能产物的分离鉴定研究》的报告，为大家分享了最新的乳酸菌菌株筛选结果。

　　张日俊教授指出，该研究的目的是寻找发现新的以抗G+为主的细菌素——乳酸菌素及新的抗生素替代品，筛选研究结果显示：6株初筛目标菌经排除酸影响后，对G+仍有较好活性，而对G-无作用；蛋白酶处理发酵上清液后，抑菌效果消失，推断抑菌成分疑似蛋白质或肽；CN4、SN4、SN5对金黄色葡萄球菌抑菌效果好，N1、N3对藤黄微球菌抑菌效果好，而N13、CN4、SN4、SN5对李斯特菌抑菌效果好；综合分析CN4、SN4、SN5菌株有相对较好和较广的抑菌活性，用作后续研究。

　　张日俊对筛选后的目标菌株进行了分子生物学等相关鉴定，并从蛋白敏感性、酸碱稳定性、热稳定性等方面对抑菌蛋白的生物学特性做了相关研究，结果表明，乳酸菌抑菌物质对大部分蛋白酶敏感，推测为蛋白类物质；在pH 4-10 之间和25-100℃处理20min抑菌蛋白保持80-90%，表现出较好的稳定性；SN4发酵16h就能达到稳定期并表现出良好的抑菌活性，并且有更好的产酸能力和发酵效率；抑菌谱表明SN4和CN4对G+有较好的抑菌效果，对G-无作用。

　　SN4细菌素的进一步分离纯化和鉴定研究中，张日俊教授通过SDS-PAGE抑菌胶认证，在分子量为3.4-10KDa之间有抑菌带，确定了细菌素的小分子蛋白特性和抑菌活性，经HPCL分离纯化得到了另外两种蛋白（4032Da、4633Da）为新的细菌素。SN4在发酵饲料应用的研究结果表明，SN4发酵猪全价料降低日粮总能、降低pH、提高乳酸菌含量。

　　张日俊教授表示，微生物胞外多糖具有免疫、抗氧化、抗炎等作用，高产胞外多糖（EPS）乳酸菌+芽孢杆菌的筛选正在进行。

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