李明：16s rRNA测序法检测乳酸菌优势明显

　　文/图农牧前沿罗丹

　　9月8日，第六届中国生物饲料科技大会在广西桂林如期召开。政府官员、饲料企业高管、畜牧业知名的院士专家学者、企业技术总监和重量级嘉宾们700余人齐聚一堂，见证全面开启生物饲料新时代的大幕开启。除此之外，还有11万余人次观看了会议网上直播。本次论坛为中国生物饲料企业提供了一个深入交流，共谋发展的高端平台。

　　本届论坛得到了各地政府领导、企业家、学者、行业精英们的积极响应。农业农村部畜牧兽医局李大鹏处长、广西壮族自治区农业厅梁雄副厅长、农业厅畜牧水产饲料处刘权处长、桂林市水产畜牧局的唐金华局长、以及来自中国农业大学张日俊教授、华中农业大学梁益祥教授；华南农业大学邓进平教授、冯定远教授，以及广西大学沈水宝教授，以及来自于新希望股份、六合股份的副总裁韩志涛先生和神爽水产集团的董事长易感峰博士等嘉宾应邀出席。

　　乳酸菌作为饲料发酵和饲料添加剂的常用菌株，其益生作用是毋庸置疑的，但其安全性的研究有待深入。风险和数量的可控方能更好的利用乳酸菌。在第六届中国生物饲料科技大会上，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所李明博士详细介绍了饲料中乳酸菌的检测技术与安全性评估，荧光定量PCR技术快速评估乳酸菌的安全性与利用16s rRNA测序对乳酸菌进行鉴定和计数，具有传统方法不可比拟的优势。

　　据介绍，乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。目前至少可分为18个属，共有200多种。常见的乳酸菌检测方法有稀释平板培养法、比浊法、湿重法、显微计数法和分子鉴定法，各检测方法都有对应的优缺点。如以常见的稀释平板培养法为例，它操作方法非常简单，但操作繁琐、培养时间长、鉴定困难，通量不高，只可计数可培养的乳酸菌。

　　要更好更高效的检测出乳酸菌，李阳博士介绍了他们实验室最新的一种研究方法——利用16s rRNA测序法分析乳酸菌种类和数量。其原理是由于微生物的数量与其酸核含量成正比。种类不同的微生物，其核酸序列各不相同，因此通过比较不同核酸序列含量的比例，即可近似得到不同微生物数量的比例。而国外利用相似的研究方法也成功的有一些新的发现。

　　对于乳酸菌安全性的评估研究方面，大部分乳酸菌被美国食品和药品管理局以及欧洲食品安全局认为是安全的，目前安全性评价也主要集中在乳酸菌抗药性基因与毒力基因上。在国外研究的50多个毒力基因上，李阳博士这边利用荧光定量PCR快速鉴定肠球菌ccf、asa1、ace、esp、cylA、gelE六种毒力基因的方法。

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